青霉素的制作主要采用微生物发酵工艺,分为菌种发酵和提取精制两个主要步骤1。
菌种发酵过程 菌种培养:将产黄青霉菌接种到固体培养基上,在25℃下培养7~10天,获得青霉菌孢子培养物1。
种子培养:用无菌水将孢子制成悬浮液,接种到种子罐内已灭菌的培养基中,通入无菌空气并搅拌,在27℃下培养24~28小时1•7。二级种子培养时接入10%一级种子,以葡萄糖和玉米浆等为培养基,培养温度25±1℃,培养时间10~14小时,通风比为(1:1)~(1:5)m³/(m³·min),搅拌转速为250~280r/min3。
发酵培养:将种子培养液接种到发酵罐已灭菌的含有苯乙酸前体的培养基中,通入无菌空气,搅拌,在27℃下培养7天1•7。在发酵过程中需补入苯乙酸前体及适量的培养基1。
发酵过程控制 温度控制:青霉素发酵的温度随所用菌株不同可能稍有差异。对菌丝生长和青霉素合成来说,所要求的温度是不一样的3。
pH值控制:一般前期应将pH保持在5.7-6.3之间,而中后期则需要保持在6.3-6.6之间7•10。是根据pH来补糖,即pH上升得快就多补,pH下降时少补或不补,以维持pH6.5~6.9范围3。
前体控制:发
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